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원천: | 효모(피치아파스토리스) | 유전자 출처: | 파렌교돈티움 앨범 |
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육체적인 외관: | 미색 루스 동결 건조 분말 | 정립: | 냉동 건조된 분말 |
활동: | 30U/mg 이상 | 저장과 취급: | 2-8℃에서 24개월 보관 |
강조하다: | 높은 대 생물 작용 프로테이나제 K,프로테이나제 K 파우더,DNA와 RNA 프로테이나제 K 파우더 |
DNA와 RNA 정화를 위한 높은 대 생물 작용 프로테이나제 K
기술
프로테이나제 K는 프로테이나제의 서브틸리신 가족의 전형적 구성원들입니다. 그것은 분자량 29kDa로, 278 아미노산류로 구성되고, pI는 8.9입니다. 프로테이나제 K는 엔도펩티다제고 그것의 활성 위치에 있는 운반입니다 삼 작용기 촉매 Asp39, His69, Ser224. 그것의 가득 찬 효소에 의한 것 칼슘, 우선적으로 소수성 아미노산 뒤에 효소 소화물 단백질에 의해 활성화했습니다. 비록 칼슘 이온이 효소 활성에 영향을 미치지 않지만, 그들은 그것의 안정성에 기여합니다. 인큐베이션 시간이 충분히 길고 프로테아제 농도 높으면 단백질은 완전히 소화될 것입니다. 프로테이나제 K는 pH 8.0의 pH 최적 조건으로, 넓은 수소 이온 농도 지수 (4-12) 위에서 또한 안정적입니다. 37 'C 내지 50-60 'C로부터의 반응 온도의 높이는 (SDS) 0.5-1%의 추가 또는 구아니디니움 클로라이드, 구아니디늄 티오시아네이트와 요소와 같이, 여러 번 활동을 증가시킬 수 있습니다.
재조합형 프로테이나제 K (rProK)는 부위-규제 돌연변이에 의해 엥리테모돈튬 앨범의 최적화된 유전자를 기반으로 효모에서 나옵니다. 그것은 크로마토그래피 공정에 의해 정화됩니다. 르프로크는 DN 분해 효소와 rna분해효소 활성이 완전히 없습니다. 생물학적 활동은 그것 하나의 장치가 유레아 변성 헤모글로빈을 가수분해할 효소의 양으로 규정되는 30U/mg 보다 더 37' C, pH 7.5 (폴린-시오칼투 시약에 의한 색)에 분마다 1.0 umol 타이로신에 대한 색 동등물을 생산할 것입니다.
DNA와 RNA 정화 동안, 많은 단백질 오염이 있고 나타납니다. 이러한 불순물은 제거되어야 합니다. 광대한 범위 세린 단백 분해 효소인 프로테이나제 K가 정화가 이러한 단백질 오염을 소화하기 위해 프로토콜화하는 많은 DNA와 RNA에서 사용됩니다. 핵산 사전 준비에 대한 프로테이나제 K의 추가는 그렇지 않았다면 정화 동안 DNA 또는 RNA를 떨어뜨릴 수 있는 뉴클레아제를 신속히 비활성화시킵니다.
다른 공급자의 프로테이나제 K와 비교해서, 헬스겐 생명공학적이 르프로크는 비슷한 결과를 가지고 있습니다.
헬스겐 생명공학적이 레컴비아난트 프로테이나제 K (rProK)는 둘다 파우더와 액체를 동결건조했습니다. 냉동 건조 파우더를 위해, 어떤 어떠한 첨가제도 있지 않습니다.
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